流氏细胞术 (Flow CytoMetry)

定义

流式细胞术是对悬液中的单细胞或其他生物粒子，通过检测标记的荧光信号，实现高速、逐一的细胞定量分析和分选技术。

原理

一束單色光（通常是激光）照到流體力學聚焦的一股流體上，若干個檢測器瞄向流束和激光相交的這個點，其中一個和激光在同一直線上（稱作前散射 (FSC) ），其它几个和激光垂直（旁散射 (SSC) 和一个或几个熒光監測器）。當每個懸浮顆粒通過光束時會按某種方式把光散射，同時所帶有的熒光化合物被激發並發射出頻率低于激發光的熒光。這些散射光和熒光的組合數據被檢測器記錄，根據各檢測器亮度的波動（每個細胞會顯出一個散射或熒光的峰）就能夠推算出每個顆粒的物理和化學性質。前散射與細胞體積相關，而旁散射取決於顆粒的内部複雜程度（比如核的形狀、胞質内顆粒的種類或者膜的粗糙程度）。

Sort particles based on their properties.

流式细胞仪组成

• 细胞流动系统：液流（鞘液 (Sheath fluid) ）携带细胞，使颗粒以串流形式通过光束。
• 光源：有通常的灯（汞或氙）、高功率水冷的激光源（氩、氪、染料激光）、低功率气冷激光（氩 (488nm)，红氦氖 (633nm)，绿氦氖，氦镉 (紫外) ）、激光二极管或激光二极管倍频（蓝、绿、红、紫）
• 检测和模数转换(analogue-to-digital conversion, ADC)系统：产生前散射、旁散射光和荧光的信号
• 放大系统：线性或对数放大
• 计算机：用于分析信号。